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      一圖讀懂細胞轉染那些事-part1
      一圖讀懂細胞轉染那些事-part1 2022-06-30

      簡析各類細胞轉染方法細胞轉染是指將外源分子如DNA,RNA等導入真核細胞的技術。定義隨著分子生物學和細胞生物學研究的不斷發展,轉染已經成為研究和控制真核細胞基因功能的常規工具。下文中將從多個維度,介紹細胞轉染的各類小知識。一、瞬時轉染與穩定轉染哺乳動物細胞表達系統能促使在其內表達...

      • MH培養基的原理及用法 2022-10-20

        MH培養基為MH瓊脂培養基,微生物中所指的MH是Mueller-Hinton的首字母縮寫,指的是水解酪蛋白。所以MH培養基也成為水解酪蛋白培養基。常用作培養基原材料,提供細菌生長所需的生長因子。MH培養基的原理:牛肉粉和酸水解酪蛋白提供氮源、維生素和氨基酸;可溶性淀粉吸收有毒的代謝產物。MH培養基的成分:酸水解酪蛋白/酸水解酪素17.5g牛肉浸膏粉2g淀粉1.5g瓊脂12gMH培養基的用法:稱取本品21.0g,加熱溶解于1000ml?蒸餾水中,121℃高壓滅菌15分鐘,備用。...

      • 介紹幾種常見的細胞轉染方法 2022-09-28

        細胞轉染技術主要分為三大類:化學法、物理法及生物學法。但是沒有一種方法是放之四海而皆準的,即沒有任何方法適用于所有細胞和所有實驗。因而只有依據自己的實驗要求選擇理想的方法,才能獲得漂亮的實驗結果。下面介紹幾種常見的細胞轉染方法:1、DEAE-右旋糖苷法常言道:同性相斥,異性相吸。因而,當帶正電的DEAE-右旋糖苷與核酸中帶負電的磷酸骨架相遇,妥妥的火花四射,而后會被細胞膜抱團相擁并通過細胞內吞作用迎客到家。該法可用于瞬時轉染,操作相對簡單、結果可重復,但是對細胞有一定的毒副作...

      • 分析影響細胞轉染效率的因素 2022-09-27

        細胞轉染指的是將外源分子如DNA、RNA等導入到真核細胞內部的技術。隨著基因和蛋白功能研究的深入,轉染已經成為科研實驗中常用的技術手段之一。對于細胞轉染實驗,轉染試劑、轉染方法、細胞狀態等都會影響到細胞轉染的效率,本文主要對影響細胞轉染效率的8個因素做一介紹。1.轉染試劑瞬時轉染和穩定轉染可以選擇不同的轉染試劑,轉染試劑的選擇又可以根據已經發表的文獻,已經有很多細胞株被成功轉染,通過文獻資料可以參考最適的轉染試劑,當然也要根據不同的實驗需求選擇。一般來說轉染試劑的要求是低毒,...

      • 胎牛血清使用中的常見問題解答 2022-09-19

        1、如何儲存和解凍血清才不會使產品質量受損?將血清從冷凍箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融。但必須注意的是,融解過程中必須規則地搖晃均勻。長時間儲存在2-8℃時,血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。因此,推薦在-20℃以下儲存血清,并避免反復凍融。我們建議血清應保存在-2O℃。若存放于4℃時,請勿超過一個月。若一次無法用完一瓶,建議無菌分裝血清至恰當的滅菌容器內,再放回冷凍。2、血清中包含絮狀...

      • 提高細胞轉染效率的方法有哪些? 2022-09-15

        轉染是將外源性基因導入細胞內的一種專門技術。分為物理介導方法:電穿孔法、顯微注射和基因槍;化學介導方法:如經典的磷酸鈣共沉淀法、脂質體轉染方法、和多種陽離子物質介導的技術;生物介導方法:有較為原始的原生質體轉染,和現在比較多見的各種病毒介導的轉染技術。理想細胞轉染方法,應該具有轉染效率高、細胞毒性小等優點。病毒介導的轉染技術,是目前轉染效率較高的方法,同時具有細胞毒性很低的優勢。但是病毒轉染方法的準備程序復雜,常常對細胞類型有很強的選擇性,在一般實驗室中很難普及。其它物理和化...

      • 介紹細胞凍存的主要步驟 2022-09-13

        細胞凍存是細胞保存的主要方法之一。利用凍存技術將細胞置于-196℃液氮中低溫保存,可以使細胞暫時脫離生長狀態而將其細胞特性保存起來,這樣在需要的時候再復蘇細胞用于實驗。而且適度地保存一定量的細胞,可以防止因正在培養的細胞被污染或其他意外事件而使細胞丟種,起到了細胞保種的作用。除此之外,還可以利用細胞凍存的形式來購買、寄贈、交換和運送某些細胞。細胞凍存時向培養基中加入保護劑--終濃度5%.15%的甘油或二甲基亞砜(DMSO),可使溶液冰點降低,加之在緩慢凍結條件下,細胞內水分透...

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